微囊牛肾上腺髓质细胞的冻存及其活性评价

目的 建立一种微囊牛肾上腺髓质细胞(bovine chromaffin cell , BCC)的冻存方法 , 为临床推广微囊人工生物细胞技术移植异种细胞奠定基础 。 方法 微囊化牛肾上腺髓质细胞冻存以二甲基亚砜为保护剂 , 循序缓慢降温(4℃ , 1h , -20℃ 2h , -50℃过夜 , 液氮) , 复苏时迅速将冻存管放入37℃水浴中 。 通过检测其基础儿茶酚胺分泌量和在高钾(58mmol/L)、乙酰胆碱(10^-4mol/L)刺激下的分泌量来观察其功能活性 。 结果 冻存复苏后微囊BCC保留了儿茶酚胺的分泌功能 , 基础与刺激分泌量分别为(3.207±0.350)ng/ml和(12.496±2.302)ng/m1 , 大约为冻存前微囊牛肾上腺髓质细胞分泌量的80%;同时刺激后儿茶酚胺分泌增加(P

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