目的:建立预处理淋巴细胞样品后经高效液相色谱(highperformanceliquidchromatography,HPLC)检测淋巴细胞合成和释放儿茶酚胺(eateeholamines,CAs)的方法,并为淋巴细胞合成和释放CAs提供直接的证据 。 方法:淋巴细胞培养液上清经氧化铝吸附,高氯酸洗脱;淋巴细胞经破细胞,去蛋白,高氯酸提取;采用AtlantisC18反相色谱柱分离淋巴细胞培养液上清以及细胞中的CAs 。 电化学检测器检测 。 结果:CAs分离效果良好,22min内完成测定,各峰形对称 。 杂质峰少 。 用刀豆蛋白A(concanavalinA,ConA)诱导的淋巴细胞培养液上清中去甲肾上腺素含量最高,其次是多巴胺.肾上腺素最少;而ConA刺激的淋巴细胞内多巴胺的含量最高,其次为去甲肾上腺素,肾上腺素最少 。 结论:对淋巴细胞样品进行预处理能提高HPLC检测的灵敏度、减少干扰,这种方法可直接检测到淋巴细胞合成和释放CAs 。 【淋巴细胞合成和释放儿茶酚胺的高效液相色谱检测】完成机构:南通大学医学院生理学教研室,南通226001
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