【怎样添加MEM培养基中补充成分?】
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GIBCO的MEM粉末包装上面有写:含谷氨酰胺,非必需氨基酸,但是不含碳酸氢钠,没有注明加碳酸氢钠的量 。我是用的10%的血清的培养基,是不是配制培养基的时候用900ML的双蒸水就好了呢?需要加碳酸氢钠多少?还需要补充一些什么成分呢?仔细看看MEM粉末的外包装标签,上面会有加碳酸氢钠的要求 。如果没有,大包装盒上一定有,1L*10的大包装盒上有加碳酸氢钠的要求,1L加2.2g碳酸氢钠 。否则请你的供应商帮你找 。至于要不要加其他成分,请根据实验目的,请教身边的老师 。一般每个科室细胞培养实验室都有操作规范 。一般培养基配制每升加入2.0-2.2g碳酸氢钠,2.7-5.4gHepes 。其他要补充的要看你所养细胞要求,例如添加L-谷氨酰胺 。因为Glutamine在液体中很易分解,且glutamine是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞会生长不良而死亡 。建议你仍补加终浓度为2mM的glutamine 。配制培养基用1000的水配 。更多这方面的知识可以到生物帮了解下,RNAi寡核苷酸定制合成服务: http://product.bio1000.com/100765/
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