病毒的核酸检测是怎么检测的?

操作方式 01 什么是核酸?
核酸是地球上所有已知的生命体必不成少的一种构成物质 。 它本家儿要分为两种:脱氧核糖核酸、核糖核酸 。
脱氧核糖核酸 , 其实就是我们常说的DNA , 地球上几乎所有生物的遗传物质 。 而很多冠状病毒的遗传物质 , 则是RNA , 也就是核糖核酸 。
所以病毒核酸检测 , 其实就是对病毒的遗传物质RNA进行检测 。
而针对病毒RNA进行检测的手艺 , 还可以分两种:一种是及时荧光RT-PCR , 一种是病原宏基因组测序(mNGS)

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及时荧光RT-PCR 01 起首要采集样本 。 因为新冠病毒是经由过程呼吸道传染人体 , 所以样本要从呼吸道采集 。 今朝常规的样本类型大致有2类:一类是用咽拭子、鼻拭子在人的上呼吸道(咽部或鼻腔)擦拭采集;另一类是收集下呼吸道痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等 。 采集到的样本将被严酷封存 , 送到尝试室 。 那边是检测员让病毒“现形”的疆场 。
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02 提取病毒的RNA
先从样本中提掏出病毒的RNA 。 具体来说 , 就是在样本中插手核酸提取试剂 , 把病毒粉碎 , 让核酸释放出来 。
*提取病毒核算必需在高级此外生物平安柜内完当作 。 图为水母尝试室蜜斯姐利用生物平安柜进行的操作演示 。
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03 把病毒RNA“反转录”当作cDNA
经由过程反转录手艺(RT) , 把病毒的RNA“反转”当作一种特异DNA , 即cDNA(因为病毒RNA布局不不变 , 所以把病毒RNA转换当作不变的cDNA会更便利检测)
这里会用到核酸检测试剂盒中一种叫“反转录酶”的物质 。 而完当作转录后 , 所有工作都将环绕cDNA睁开 。

04 进行cDNA的扩增与检测
简单说就是扩增cDNA的数目 。 这里应用的就是PCR , 全称聚合酶链式反映 。 具体来说 , 就是借助试剂盒中一些特别物质 , 让cDNA不竭复制 , 使其数目呈指数式增加 。
所谓RT-PCR , 就是将RNA的反转录(RT)和cDNA的扩增(PCR)相连系的手艺 。
当cDNA扩增的同时 , 试剂盒中还有一种叫荧光探针的工具同时工作 。 它会释放荧光旌旗灯号 , cDNA每完当作一次扩增 , 荧光旌旗灯号就会增添一点 , 而PCR检测仪就能记实到一个荧光旌旗灯号增添的Ct值 。
*图中左边白色的仪器叫QPCR仪 。 上面说到的转录、扩增、检测都是在这台QPCR仪上完当作 。 电脑上显示的红线 , 我们也可以理解为Ct值的曲线 。
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05 出成果
这一步就是按照检测仪记实的Ct值 , 进行检测成果阐发 。
抱负状况下 , 若是样本中有新冠病毒 , 那么在cDNA完当作预订次数的扩增后 , 检测仪记实的Ct值就会形当作一个逐渐上升的S形曲线 , 检测成果为阳性;若是没有近似的S型曲线 , 检测成果就为阴性 。

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